Auswerten von Chromatogrammen

In erster Näherung ist die Fläche eines chromatographischen Peaks proportional zu dessen Masse. Voraussetzung für die quantitative Auswertung von Peakflächen ist die Kenntnis des Faktors, der Fläche und Stoffmenge verbindet. Dieser Peakfaktor kann durch Eichung mit bekannten Stoffmengen ermittelt werden. Eine Messung, die Peaks bekannter Masse enthält, ist eine Referenzmessung. Peaks, deren Masse bekannt ist, werden hier grün eingefärbt, grün „in der Hoffnung, dass alles richtig gemacht wurde“.

Die Ermittlung absoluter Mengen setzt also zwei Messungen voraus: Die Referenzmessung mit bekannter Stoffmenge und die Hauptmessung mit unbekannter Menge. Eine entscheidende Voraussetzung ist weiterhin, dass eben diese zwei Messungen unter gleichen Bedingungen vorgenommen werden. Diese wichtigsten Bedingungen sind: Splitverhältnis, Temperaturprogramm, Gasart und Druck.

Vorgehensweise

· Öffnen Sie die Hauptmessung mit dem „Messung öffnen“ Dialog in das Hauptdisplay.

· Markieren Sie den zu messenden Peak in der Hauptmessung, je ein Doppelklick setzt die Begrenzungen eines Peaks, er muss hernach die Farbe Blau annehmen.

· Betätigen Sie die Schaltfläche „Messungen vergleichen“ in der Menüleiste.

· Öffnen Sie die Referenzmessung mit der bekannten Stoffmenge.

· Zoomen und verschieben Sie die beiden Messungen so, dass der Referenzpeak (grün) und der Messpeak (blau) ungefähr übereinander liegen.

· Betätigen Sie die Taste „Peaks vergleichen“.

· Fahren Sie mit dem Liniencursor so in die Hauptmessung, dass die Linie durch Referenzpeak und Messpeak verläuft und klicken Sie mit der linken Maustaste.

Abb. 9: Peakvergleich

Nun erscheint in der Peakliste die Masse sowie der Peakfaktor. Der geeichte Peak wird nun grün, da seine Absolutmasse bekannt ist. Sinnvollerweise sollten Sie dem quantifizierten Peak auch einen Namen geben, doppelklicken Sie dazu in der Peakliste die entsprechende Zelle und tragen Sie den Namen ein. Speichern Sie die Hauptmessung!